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毕赤发酵罐怎么进行灭菌前的准备工作
发酵罐灭菌前: 室温下校准PH电极,先校6.86零点再4.0斜率(若的发酵pH很长时间是酸性的(如酵母发酵)用6.86校正零点,4.0校正斜率;若你的发酵pH很长时间是碱性的(如某些细菌发酵)用6.86校正零点,9.18校正斜率); 室温下校准溶氧电极,1.0点在不接溶氧电极时候标定,100%点接上溶氧电极,放置在空气中较定;或2.0点在灭菌过程中,温度达到121度左右压力0.12mpa左右时候标定,100%在灭菌结束,降温至发酵温度并稳定,转速在发酵初始转速,通气量在发酵初始通气量时候标定灭菌:灭菌,先将各排气阀打开,将蒸汽引入夹套或蛇管进行预热,待罐温升至80~90℃,将排气阀逐渐关小。
1.接着将蒸汽从进气口、排料口、取样口直接通入罐中(如有冲视罐也同时进汽),使罐温上升到118~120℃,罐压维持在0.09~0.1Mpa(表压),并保持30min左右。保温结束后,依次关闭各排汽、进汽阀门,待罐内压力低于空气压力后,向罐内通入无菌空气,在夹套或蛇管中通冷却水降温,使培养基的温度降到所需的温度,进行下一步的发酵和培养。
2.注意压力:灭菌时,总蒸汽管道压力要求不低于0.3~0.35Mpa,使用压力不低于0.2Mpa。)灭菌后:消耗甘油阶段灭菌后冷却30℃时:冷却至30℃时,开启搅拌(转速最大)和通气(0.1-1.0vvm),接通28%氨水(未稀释)调PH5.0;每升加4.35ml的无菌PTM1基础盐;从摇瓶中接种种子液,DO值为100%,开始培养后会消耗,导致DO值下降,通氧气以确保DO值超过20%,速率先为0.1vvm。